Intracellular signalling mechanisms and clinical relevance of procoagulant platelets. Focus on the role and regulation of calcium and sodium ion fluxes

Details

Request a copy
Serval ID
serval:BIB_10AAEDA9E21E
Type
PhD thesis: a PhD thesis.
Collection
Publications
Institution
Title
Intracellular signalling mechanisms and clinical relevance of procoagulant platelets. Focus on the role and regulation of calcium and sodium ion fluxes
Author(s)
ALIOTTA Alessandro
Director(s)
Alberio Lorenzo
Institution details
Université de Lausanne, Faculté de biologie et médecine
Publication state
Accepted
Issued date
2021
Language
english
Abstract
Blood platelets are an essential component of a stable haemostatic plug. At site of vascular lesion, upon combined strong activation by collagen and thrombin, a fraction of platelets loose aggregatory properties and become procoagulant. These procoagulant collagen-and-thrombin (COAT) activated platelets have been correlated with various clinical events, but the dichotomous intracellular signalling generating procoagulant platelet activity instead of traditional aggrega'ting endpoints is still not fully elucidated.
ln the first part of this thesis, 1 describe the implementation and the feasibility of a novel flow­ cytometric method to monitor over time cytosolic free calcium, sodium, and potassium ion fluxes upon platelet activation.
ln a second step, 1 detail how this technique was applied to (i) better characterize ion mobilization in procoagulant COAT platelets and to appreciate their modulation by the sodium-calcium exchanger function mode and epinephrine, and (ii) to investigate procoagulant response within selected patients. 1 will end this thesis with the method implementation and the preliminary data obtained with the first phosphoproteomic analyses in order to draw a reliable procoagulant phosphoproteome.
The knowledge derived from this project may be applied to further studies on the intracellular mechanisms to better explain and decipher missing information on human platelet activation pathways leading to either an aggregation response or a procoagulant activity.
Moreover, this may bring in the future new insights to dissect the mechanisms underlying platelet disorders and a possible result of this research couId be to identify targets for the development of new therapies able to modulate platelet function and procoagulant activity in thrombotic or haemorrhagic disorders.
--
Lors d'une lésion vasculaire, les plaquettes sanguines sont une composante essentielle d'un caillot sanguin nécessaires pour stopper le saignement et prévenir l'hémorragie. Dans cette situation et lors d'une forte activation combinée par le collagène et la thrombine, une fraction des plaquettes perd ses propriétés d'agrégation et devient procoagulante. L'activité de ces plaquettes procoagulantes appelées COAT (induites par le COiiagène et (And) la Thrombine) est associée avec diverses situations cliniques, mais la signalisation intracellulaire générant une activité plaquettaire procoagulante au lieu d'une agrégation n'est toujours pas complètement élucidée.
Dans la première partie de cette thèse, je décris la mise en œuvre et la faisabilité d'une nouvelle méthode de cytométrie en flux pour surveiller au cours du temps les flux d'ions (calcium, sodium et potassium) lors de l'activation des plaquettes.
Pans La deuxième partie, je détaille comment cette technique a été appliquée pour (i) mieux caractériser la mobilisation des ions dans les plaquettes COAT procoagulantes ainsi que pour comprendre sa modulation par le mode d'action de l'échangeur sodium-calcium et de l'adrénaline, et (ii) pour étudier la réponse procoagulante chez des patients.
Je termine cette thèse par la mise en œuvre de la méthode et la présentation de données préliminaires obtenues afin d'établir un phosphoprotéome fiable des plaquettes procoagulantes.
Les connaissances issues de ce projet permettront de poursuivre avec d'autres études sur les mécanismes intracellulaires, afin d'élucider les informations manquantes sur les voies d'activation des plaquettes conduisant soit à une réponse d'agrégation, soit à une activité procoagulante.
De plus, cela pourrait apporter à l'avenir de nouvelles connaissances pour disséquer les mécanismes sous-jacents aux troubles plaquettaires et une finalité possible de cette recherche pourrait être d'identifier des cibles pour le développement de nouvelles thérapies capables de moduler la fonction plaquettaire et l'activité procoagulante dans les troubles thrombotiques ou hémorragiques.
Create date
08/07/2021 10:15
Last modification date
09/07/2021 5:37
Usage data