Abstract
This thesis investigates the pathogenicity of a Chlamydia-related bacterium: Waddlia
chondrophila, which is suspected to cause abortion in bovines as well as
miscarriages in humans.
Macrophages represent the first line of defense of the innate immunity against
invading pathogens, we thus studied the interaction between W. chondrophila and
human macrophages. We observed that W. chondrophila multiplied very efficiently
inside monocyte-derived macrophages.
Diagnostic tools to detect obligate intracellular bacteria are lacking so we developed
a Waddlia specific real-time PCR based on the 16S rRNA encoding gene.
Since W. chondrophila could be involved in human miscarriage, we analyzed
samples from women having miscarriage or uneventful pregnancy. Waddlia
serologies results confirmed an association between the presence of W.
chondrophila antibodies and miscarriage (23.2% versus 14.6% in the control group,
p-value 0.044).
As W. chondrophila's pathogenicity was suggested, we studied its antibiotic
susceptibility. W. chondrophila revealed to be susceptible to macrolides and
tetracylines but resistant to beta-lactams and fluoroquinolones. This resistance to
fluoroquinolones could be explained by mutations in the quinolone resistance
determining region of the gyrase (GyrA) and topoisomerase IV (ParC) encoding
genes.
In conclusion, this thesis allowed to precise the role of W. chondrophila in human
miscarriage. However, more studies will be necessary to fully understand the
pathogenesis of W. chondrophila in adverse pregnancy outcomes.
Résumé
Le but de cette thèse a été d'étudier la pathogénicité d'une bactérie apparentée aux
Chlamydia: Waddlia chondrophila.
Les macrophages représentant la première ligne de défense du système immunitaire inné
contre les pathogènes, nous avons d'abord étudié l'interaction entre W. chondrophila and les
macrophages humains. Nous avons pu observer que W. chondrophila résistait aux
effecteurs microbicides des macrophages et se multipliait efficacement au sein de ces
cellules.
Au vu du manque d'outils diagnostiques pour détecter cette bactérie intracellulaire
obligatoire, nous avons également développé une PCR en temps réel, spécifique pour
Waddlia, basée sur le gène de l'ARN ribosomal 16S. Cette PCR a été utilisée dans les
différents projets afin de détecter la présence de W. chondrophila.
W. chondrophila étant suspectée de pouvoir causer des fausses couches chez la femme,
nous avons analysé des échantillons provenant de femmes ayant souffert de fausse couche,
ainsi que, comme contrôles, des femmes ayant eu une grossesse normale. Les sérologies
ont révélé une association entre la présence d'anticorps dirigés contre Waddlia et la fausse
couche (23.2% versus 14.6% chez les contrôles, p-value=0.044). La présence de la bactérie
a aussi été détectée par PCR et immunohistochimie dans plusieurs échantillons.
L'implication de W. chondrophila dans la fausse couche se précisant, nous avons étudié sa
susceptibilité aux antibiotiques. W. chondrophila s'est révélée sensible aux macrolides et aux
tetracyclines mais résistante aux beta-lactames et aux quinolones. Cette résistance aux
quinolones peut être expliquée par la présence de mutations dans le QRDR (région
déterminant la résistance aux quinolones) des gènes gyrA et parC.
En conclusion, cette thèse a permis de préciser l'implication de W. chondrophila dans la
fausse couche. Des études complémentaires seront cependant nécessaires pour confirmer
et préciser le rôle exact de W. chondrophila dans les problèmes obstétricaux.